Seminario del Departamento Química Biológica

T. cruzi presenta cuatro ortólogos AQPX. En este trabajo, evaluamos experimentalmente la función de dos de ellos: TcAQPα y TcAQPδ. Para ello realizamos, para ambos canales, estudios de expresión heteróloga en Saccharomyces cerevisiae y oocitos de Xenopus laevis, y generamos líneas knockout y taggeadas mediante edición génica con CRISPR/Cas9.
Nuestros resultados indican que tanto TcAQPα como TcAQPδ son canales intracelulares, tanto en los sistemas heterólogos como en el parásito, y que se expresan en todos los estadios del ciclo de vida del parásito. Sin embargo, sus patrones de localización endógena difieren: mientras TcAQPα se encuentra en el bolsillo flagelar, TcAQPδ se distribuye en vesículas a lo largo del cuerpo del parásito. Las líneas knockout generadas fueron viables, lo que sugiere que ninguno de estos genes es esencial para la supervivencia del parásito. No obstante, la viabilidad de las líneas editadas frente a distintas condiciones de estrés reveló respuestas diferenciales: TcAQPα parece participar en la respuesta al estrés oxidativo inducido por H₂O₂, mientras que TcAQPδ no mostró un rol evidente en este contexto. Por otro lado, evaluamos la infectividad de las líneas editadas en células Vero y observamos que ambas presentan una disminución en su capacidad de infección.
El objetivo de este seminario es presentar y discutir estos hallazgos y sus implicancias, que contribuyen al avance en la caracterización de las acuaporinas AQPX en T. cruzi.